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ELISA試劑盒單倍體胚胎干細(xì)胞同時具有單倍體細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的特性,由于其只含有一套染色體,不存在等位基因在基因功能上的補(bǔ)償作用,因此是研究隱性基因功能的理想模型。同時,其胚胎干細(xì)胞的特性又可以將基因修飾直接遺傳給后代,從而避免了其他轉(zhuǎn)基因方法種系嵌合等方面的要求,可以很大提高基因修飾的效率及應(yīng)用范圍。
ELISA試劑盒利用基因定點修飾技術(shù)CRISPR-Cas系統(tǒng),可快速地在單倍體干細(xì)胞上進(jìn)行定位的基因修飾或敲除,并且處理后的細(xì)胞仍能維持單倍體和多能性狀態(tài)。尤為重要的是,該工作證明了大鼠單倍體胚胎干細(xì)胞同樣具有替代精子與卵母細(xì)胞“受精”并產(chǎn)生健康大鼠的能力。
ELISA試劑盒通過種系嵌合和替代精子進(jìn)行卵胞質(zhì)注射兩種途徑,該團(tuán)隊都成功獲得了健康的攜帶基因修飾的大鼠,從而證明大鼠孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞可以將基因修飾快速地遺傳給后代,為研究基因功能提供了便利。
ELISA試劑盒具有發(fā)育功能的單倍體胚胎干細(xì)胞系,而且利用CRISPR-Cas技術(shù)完成對大鼠單倍體胚胎干細(xì)胞的多基因敲除,為建立用于大規(guī)?;蚝Y選的純合的基因突變細(xì)胞庫打下基礎(chǔ)。鑒于大鼠在生理上比小鼠更類似于人類,這一工作將對人類疾病模型研發(fā)和開展基因功能研究起到重要的推動作用。