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獲得更理想的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果辦法:
1)請(qǐng)配制標(biāo)準(zhǔn)品及工作液A和B,以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差。
2)酶標(biāo)板在溫育時(shí)應(yīng)加膜覆蓋以避免液體蒸發(fā)。
3)檢測(cè)液A和檢測(cè)液B,以及底物溶液在使用前,應(yīng)置于37℃溫育30分鐘待用。
4)洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下一步操作,避免酶標(biāo)板長(zhǎng)時(shí)間處于干燥狀態(tài)。
使用ELISA試劑盒時(shí)樣本的準(zhǔn)備方法:
1、高值樣本:
(1)選取含被測(cè)物的高值樣本,必要時(shí)可添加被分析物的純品,并計(jì)算出理論值。
(2)至少選用三個(gè)高濃度樣本,稀釋倍數(shù)應(yīng)為方法性能標(biāo)明的zui大稀釋倍數(shù)、并適當(dāng)增加或減小稀釋比例。
(3)使用混合血清或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液,或測(cè)定方法要求的稀釋液對(duì)高值待測(cè)樣本進(jìn)行稀釋,使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi),并記錄稀釋倍數(shù)。
2、抗凝血酶Ⅲ抗體ELISA試劑盒低值樣本:
(1)將待測(cè)樣本用混合人血清(含被分析物濃度水平較低)。
(2)或5%牛血清白蛋白生理鹽水溶液進(jìn)行稀釋,產(chǎn)生接近于方法線性范圍低限濃度水平的樣本,
(3)一般為5個(gè)濃度水平,濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。