人ELISA試劑盒的操作保存方法
發(fā)布時間: 2013/11/12 點擊次數(shù): 536次
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研域(上海)化學試劑有限公司 |
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人ELISA試劑盒操作注意事項 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 人ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 試劑的準備 標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行: 80 ug/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 40 ug/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 20 ug/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 10 ug/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 5.0 ug/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 2.5 ug/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 0 ug/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
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