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ELISA試劑盒用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值比較較,從而判別標本中牛支原體的存在與否。此外,3種試劑盒對牛傳染性肋膜肺炎世界標準血清(PS2)的檢測成果顯現(xiàn)HVRI試劑盒和Kit 1均為為陰性,Kit 2為陽性。因而,HVRI試劑盒與Kit 1更適于M.bovis檢測和開展流行病學調(diào)查。用純化的牛支原體抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中支原體相結(jié)合,經(jīng)洗刷除掉未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP符號的支原體抗體結(jié)合,構(gòu)成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)由*洗刷后加底物TMB顯色。
牛支原體酶聯(lián)免疫剖析試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中牛支原體。一致性檢修成果顯現(xiàn):HVRI試劑盒與Kit 1的一致性較高;Kit 2與HVRI試劑盒、Kit 2與Kit 1有中度的一致性。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*的。成果表明:本實驗室制備的HVRI試劑盒與商品化試劑盒Kit 1的檢測成果和歸納檢測成果符合率別離到達92%和96%;而商品化試劑盒Kit 2的檢測成果與歸納檢測成果符合率僅為74.67%。
ELISA試劑盒為比較3種抗牛支原體(M.bovis)血清抗體的ELISA試劑盒檢測作用,本實驗使用3種檢測M.bovis血清抗體ELISA確診試劑盒對38份陽性樣品(天然感染19份,人工感染18份)和37份陰性樣品進行檢測。